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酶标仪使用注意
发布日期： 2022/10/13 17:21:29

酶标仪（Microplate Reader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应是通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
酶标仪的工作原理
    使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
检测单位：
光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：
E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表示被吸收的光密度，Ⅰ0为在检测物之前的光强度，Ⅰ为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算：
E=OD=C×D×E
其中：C为检测物的浓度；D为检测物的厚度；E为摩尔因子。
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
酶标仪维护保养注意事项：
    1、仪器应放置在无磁场和干扰电压，低于40分贝的环境下；
    2、应避免阳光直射以防止设备老化；
    3、操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间；
    4、运行中操作电压应保持稳定；
    5、操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘；

    6、保持干燥、干净、水平的工作台面，足够大的操作空间；

    7、使用加液器加液，加液头不能混用；

    8、尽量配套使用洗板机洗板，能有效避免交叉污染；
    9、在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手；
    10、请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手；
    11、如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。
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